抗 MAP 激酶，活化（二磷酸化 ERK-1&2）抗体，小鼠单克隆，200UL，M9692-200UL，Sigma

General description

丝裂原激活蛋白激酶 (MAPK) 又称细胞外信号调节激酶 (ERK)，分为 ERK1 (MAPK3) 和 ERK2 (MAPK1) 两种亚型。ERK2 对应于人类染色体 22q11.2。ERK1 对应于人类染色体 16p11.2。
小鼠抗 MAP 激酶（活化形式，二磷酸化ERK-1&2）单克隆抗体（小鼠 IgG1 同种型）源自 MAPK-YT 杂交瘤，该杂交瘤是由小鼠骨髓瘤细胞 (NS1) 和来自经免疫接种的 BALB/c 小鼠的脾细胞融合产生的 合成磷酸化肽，含有与磷酸化形式的 ERK 活化环相对应、与 KLH 结合的的氨基酸。通过使用小鼠单克隆抗体同种型试剂（产品号ISO2）和双扩散免疫检测，以确定同种型。

Immunogen

对应于 ERK 活化环磷酸化形式的合成肽 HTGFLpTEpYVAT。

Application

该抗体可用于培养细胞和组织提取物的免疫印迹应用，工作浓度0.5-1.0 μg/mL。1:80-1:100 的工作稀释度适用于免疫组织化学（福尔马林和甲醛固定切片）。该抗体还可用于免疫细胞化学、免疫沉淀、间接 ELISA 和蛋白质微芯片。
小鼠抗 MAP 激酶单克隆抗体（活化状态，二磷酸化ERK-1&2）可用于检测

• 使用免疫荧光显微镜观察心肌细胞中的 ERK1/2
• 人嗜酸性粒细胞中的 ERK1/2（免疫印迹法）
• 蛋白质芯片检测人支气管上皮细胞 ERK
• 使用免疫荧光试验和免疫印迹分析人肝细胞系中的 ERK 蛋白
• 免疫沉淀法测定人胚肾细胞中的 ERK1/2

Biochem/physiol Actions

单克隆抗 MAP 激酶，活化的（二磷酸 ERK-1 和 2）对 MAP 激酶的活性、双磷酸化形式（分别为 ERK-1 和 ERK-2，44 kDa 和 42 kDa）具有特异性。在人、牛、大鼠、小鼠、仓鼠、非洲爪蟾 、果蝇 、草地贪夜蛾、线虫和酵母中观察到了反应性。
抗体与 MAP 激酶的二磷酸化形式（ERK-1 和 ERK-2）发生特异性反应。它不能识别 MAP 激酶的非磷酸化或单磷酸化形式或 JNK 和 p38 MAP 激酶的二磷酸化形式。该抗体识别的表位包含活性 MAP 激酶调控站点内的磷酸化苏氨酸和酪氨酸残基。
酶的丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）超家族参与广泛信号通路。 这一家族成员包括ERK1/2（细胞外信号调节蛋白激酶，又称 p42/p44 MAPK）、JNK 和 p38 MAPK 亚家族。这些酶是信号级联反应中的末端酶，每个激酶都会磷酸化并激活序列中的下一个酶。酪氨酸和苏氨酸的磷酸化对完全激活所有 MAPK 至关重要。几种激酶参与激活 ERK级联反应。这一级联反应由小G蛋白 Ras引发，此蛋白受到刺激后会激活 Raf1激酶。Raf1 通过激活 MEK 继续传递。激活后的 MEK 或是**能够特异性磷酸化和激活ERK的激酶。ERK 是一种重要的调节分子，可以磷酸化胞浆中的调节靶标（磷脂酶A2，PLA2），也可以磷酸化转移至细胞核中的底物（ELK1）。ERK 级联反应的激活介导并调节信号转导通路，应对应激，响应有丝分裂信号，在发育和分化、学习、记忆和生存中具有重要意义。
抗 MAP 激酶（活化状态，二磷酸化 ERK-1 和 2）单克隆抗体对活性双磷酸化形式的 MAP 激酶（ERK-1 和 ERK-2，分别为 44 kDa 和 42 kDa）具有特异性。该抗体识别的表位包含活性MAP激酶（ERK-2中的Thr¹⁸³和Tyr¹⁸⁵）调节位点内的磷酸化苏氨酸和酪氨酸残基。它无法识别非磷酸化或单磷酸化形式的 MAP 激酶分子，或二磷酸化形式的Jun 激酶 (JNK) 和 p38 MAP 激酶。
MAPK 介导的信号通路与神经退行性疾病和癌症的发病机制有关。ERK1 基因位点的缺失与 DiGeorge 综合征 (DGS) 和腭心面综合征 (VCFS) 以及先天性心脏缺陷有关。MAPK3 基因位点重排可能参与自闭症谱系障碍和精神分裂症的发病机制。

Physical form

溶于磷酸盐缓冲液 (pH 7.4) 中，含有 15 mM 叠氮化钠。

Preparation Note

如需连续使用，可在 2-8°C 下储存长达一个月。若要延长储存时间，请在-20°C 下冷冻工作等分试样。不建议反复冻融或储存在无霜冰柜中。如果延长储存时间后出现轻微浑浊，则在使用前离心澄清溶液。如果未在 12 小时内使用，工作稀释液应丢弃。

Disclaimer

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