蛋白酶 K 来源于林伯氏白色念球菌,1ML,P4850-1ML,Sigma

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品牌型号 Sigma P4850-1ML
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产品介绍 Product Description

Application

来源于白色念球菌(Tritirachium album)的蛋白酶K已被用于:

  • 牛子宫内膜上皮细胞疱疹病毒DNA的提取
  • 从鼻拭子中提取病毒RNA
  • 作为锁相和直接PCR裂解缓冲液的成分


该产品已被用于研究其对丝素蛋白的预处理效果。该研究对羟基磷灰石(HAp)的晶体学性质,以及复合材料的微观结构和显微硬度进行了分析。该酶还可用于利用FISH技术促进探针对rRNA的标记,从而对致病性 金黄色葡萄球菌进行检测。
在分离DNA和RNA的过程中,对核酸酶的蛋白水解失活起作用。
在分离DNA和RNA的过程中,用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白,如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道,其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理,暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。


Biochem/physiol Actions

蛋白酶K具有广泛的特异性,即使在天然状态下也可降解许多蛋白质。它主要切割脂肪族和芳香族氨基酸(带有封闭的α-氨基)的羧基相邻的肽键。根据氨基酸序列,蛋白酶K的分子量为28,930Da 根据SDS-PAGE,其分子量为28,500Da。最适pH值在7.5-9.0之间 其等电点为8.9。其需要Ca2+(1-5mM)进行激活。蛋白酶K可被DIFP(二异丙基氟磷酸盐)或PMSF(苯甲基磺酰氟)抑制。
蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族,具有活性位点催化三联体(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列广泛的环境中均稳定:pH,缓冲盐,去污剂(SDS)以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下,蛋白酶K可保持活性,在不损害分离DNA完整性的前提下,可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。


Physical form

溶于含有10mM Tris-HCl(pH 7.5)和1mM乙酸钙的40%甘油(v / v)溶液中。


Other Notes

在pH7.5,37℃条件下,一个单位每分钟可将尿素变性血红蛋白水解并生成相当于1.0 μmole酪氨酸的颜色(利用Folin-Ciocalteu试剂进行显色)。


Legal Information

PicoGreen is a registered trademark of Life Technologies


技术参数 Specifications
gradeMolecular Biology
Quality Level200
formbuffered aqueous glycerol solution
mol wt 28.93 kDa
concentration≥10 mg/mL,≥800 units/mL
impurities≤0.5 ppm DNA (PicoGreen® assay)
foreign activityDNase, Nickase and RNase, none detected
storage temp.2-8°C
长度(mm)
宽度(mm)
高度(mm)
重量(kg)
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