脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺,5VIALS,D4263-5VL,Sigma

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品牌型号 Sigma D4263-5VL
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产品介绍 Product Description

Application

DNA酶I被用来产生DNA缺口,作为将带标记的碱基整合到DNA中的**步。在MMTV-Wnt-1小鼠乳腺肿瘤肿瘤干细胞的分离和分子表征过程中,Sigma的DNAse I与其他酶一起被用于肿瘤的收集和分离。
已有研究关于牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I用于根据哺乳动物的脱氧核糖核酸酶I组织浓度的不同将其分为三种类型。牛胰腺脱氧核糖核酸酶I也被用于比较从牛、羊和猪胰腺中分离的脱氧核糖核酸酶的三种主要结构的研究。
用于从蛋白质样品中除去 DNA。


Biochem/physiol Actions

DNase I是一种核酸内切酶,作用于嘧啶附近的磷酸二酯键,产生末端为5-磷酸的多核苷酸。在Mg2+存在时,DNAse I对每条DNA链进行独立的裂解,裂解位点是随机的。在Mn2+存在下,两条DNA链几乎在同一位点被裂解。发现其**pH值为7和8。二价阳离子,如Mn2+、Ca2+、Co2+和Zn2+ 是该酶的激活剂。浓度为5mM的Ca2+ 可以稳定酶的蛋白水解消化。牛胰腺DNA酶I由A、B、C、D四种色谱可分辨组分组成,摩尔比分别为4:1:1。仅发现少量的D。2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠(SDS) 和肌动蛋白 是已知的抑制该酶活性的物质。


Features and Benefits

高效去除DNA:牛胰腺脱氧核糖核酸酶I是一种有效的核酸内切酶,可随机切割双链DNA,因而成为从蛋白质样品中去除DNA的可靠选择。

多用途应用:这种酶可用于对DNA切口,将标记碱基掺入DNA中,以及分离和分子表征小鼠乳腺肿瘤中的癌症干细胞。它还可用于对从牛、绵羊和猪胰腺分离的脱氧核糖核酸酶进行比较研究。

稳定性:此酶可在60 °C、pH 5-7条件下保持活性长达5小时,并可在−20 °C下储存长达一周且活性损失极小。这一稳定性使其成为高性价比便捷之选。


Preparation Note

该酶粉可在pH值为4.0-9.0的水中或任何缓冲液中进行复溶,磷酸盐缓冲液除外。应避免钙螯合剂的存在。在0.15 M NaCl中加入10 mg/mL DNAse I溶液,在 −20°C的温度下保存一周,其活性可能会降低10%。同样的溶液分装储存在2-8°C中,其活性可降低约20%。它在60°C下,pH值5到7之间可保持活性长达5小时,在68°C时在<10分钟内失去活性。在醋酸盐缓冲液(pH 5.0)和tris缓冲液(pH 7.2)中,当浓度为1mg/mL时,其活性以6%/小时的速度丧失。


Analysis Note

由缩二脲测定的蛋白质。


Other Notes

一个Kunitz单位可以DNA、I型或III型作为底物,在25°C的pH 5.0条件下每分钟每毫升产生0.001的ΔA260


技术参数 Specifications
biological sourcebovine pancreas
Quality Level200
formpowder
specific activity1700—2300 U/vial
mol wt ~31 kDa
purified bychromatography
packagingvial of ≥0.25 mg total protein
technique(s)DNA extraction: suitable
solubility0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear
suitabilitysuitable for molecular biology
application(s)diagnostic assay manufacturing
storage temp.−20°C
长度(mm)
宽度(mm)
高度(mm)
重量(kg)
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