DOTAP脂质体转染试剂，5X400UL，11202375001，Roche

General description

DOTAP脂质体转染试剂是由阳离子脂质DOTAP的脂质体配方试剂。不同于其他的脂质体试剂，本品在有无血清的条件下均具有高效的转染能力。而且还能够成功应用于体内转染。将DOTAP与DNA混合能够自发形成稳定的复合物。用户可向细胞培养基中直接添加这些复合物。这种DNA转染方法非常温和，能够避免由脂质体或其他转染方法引发的细胞毒性效应。

Application

DOTAP (N-[1-(2,3-Dioleoyloxy)propyl]-N,N,N-trimethylammonium methyl-sulfate) 脂质体转染试剂是一种阳离子脂质DOTAP的脂质体配方。DOTAP可用于DNA的高效转染，包括酵母人工染色体（YAC）转染至真核细胞用于瞬时或稳定基因表达，并也适合于高效的将其他带负电分子，如RNA、寡核苷酸、和谷氨酸、核糖蛋白（RNP）复合体以及蛋白，转移至哺乳动物细胞的研究样本中。
由阳离子脂质体组成的化合物，用于向真核细胞中转染DNA、RNA及其他负电性分子。DNA与DOTAP混合时会自动形成稳定的复合物，后者可直接加入细胞培养基中。这些复合物能够与细胞膜融合并向细胞质中释放DNA。细胞被高效转染的同时不会产生细胞毒性。每μg DNA需使用5-10 μg左右的DOTAP，每mL 细胞培养基需加入约10-20 μg DOTAP。**的工作浓度和转染试剂视被转染的细胞系，以及转染试材类型（RNA、DNA、蛋白）而定。

Features and Benefits

• 操作简便：将脂质体与DNA溶液进行简单混合，即可直接添加到细胞中
• 高效：效率比磷酸钙（沉淀）法或DEAE-葡聚糖法高5至100倍
• 温和：无细胞毒性效应
• 灵活：有无血清的条件下均十分有效。适用于各类物种以及不同细胞类型（如昆虫细胞、哺乳动物细胞）。兼容瞬转或稳转的操作流程。
• 在MBS（MES缓冲溶液，pH 6.2，氩气下封装）中保存的含水分散体（脂质体），1mg/ml，经过滤消毒。

Preparation Note

工作浓度：约5 - 10μg DOTAP/μgDNA，10 - 20μg DOTAP/ml 细胞培养基。
**工作浓度取决于若干参数，包括所使用的细胞类型、应用浓度与核酸种类（DNA、RNA），以及孵育时间。对于所研究的某一细胞类型转染条件的优化至关重要。
细胞毒性在浓度高达100μg/ml的条件下未发现细胞毒性（PBLs，HeLa 细胞）。

Other Notes

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。