CRISPR 植物，50UL，CRISPRPL-1EA，Sigma

General description

一体化的即用型Cas9和向导RNA（gRNA）表达质粒，可用于单子叶植物和双子叶植物。

CRISPR植物Cas9产品可用于农杆菌属介导的植物转化或基因枪微粒轰击或原生质体转化。该产品是基于酿脓链球菌的IIA型CRISPR-Cas9。天然的Cas9编码序列经过密码子优化，可分别用于在单子叶植物和双子叶植物中进行表达。单子叶植物Cas9构建体含有可驱动sgRNA表达的单子叶植物U6启动子，双子叶植物Cas9构建体含有双子叶植物U6启动子。

植物筛选标记物包括：

• 潮霉素B抗性基因
• 新霉素磷酸转移酶基因
• 抗除草剂基因（草丁膦乙酰转移酶）

Application

• 基因失活
• 靶标验证
• 目的基因的位点特异性整合
• 通过HR替换基因

Biochem/physiol Actions

CRISPR/Cas 系统被细菌和古细菌用作防御入侵病毒和质粒的防御。最近，来自细菌化脓性链球菌的 II 型 CRISPR/Cas 系统已经被设计成使用两种分子组分在真核系统中起作用：单个 Cas9 蛋白和非编码指导 RNA（gRNA）。Cas9 核酸内切酶可以用单个 gRNA 编程，将 DNA 双链断裂（DSB）导向所需的基因组位置。与由锌指核酸酶（ZFN）诱导的 DSB 类似，细胞然后激活内源 DNA 修复过程，非同源末端连接（NHEJ）或同源定向修复（HDR），以愈合目标 DSB。

Features and Benefits

• CRISPR/Cas9的主要优势在于其具有简单性、易用性、低成本和通用性。
• CRISPR/Cas9系统不需要任何蛋白质工程步骤，更易于检测每个目标基因的多个gRNA
• 只需改变gRNA序列中的20个核苷酸，即可获得不同的靶点特异性
• 与ZFN和TALEN相比，CRISPR/Cas9的另一个优势在于它可同时在多个位点导入DSB，从而实现对多个基因同时进行编辑。这对于敲除多余基因或平行通路特别有帮助。使用CRISPR/Cas9系统进行同时编辑，只需单体Cas9蛋白以及任何数量的、不同的序列特异性gRNA。
• CRISPR/Cas9系统可切割人类细胞中的甲基化DNA，其达到的基因修饰超越了其他核酸酶。这一点尚未在植物中进行探索，可以认为切割甲基化DNA是CRISPR/Cas9系统特有的功能，并且与目标基因组无关。

Other Notes

1管含50μl的20ng/μl质粒DNA
在不使用时，将试管盖扣紧。
利用无菌实验技术，避免DNAase污染。
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Legal Information

CRISPR 使用许可协议