GenElute™ 哺乳动物总RNA小量制备试剂盒，1KIT，RTN70-1KT，Sigma

General description

Click here to view the kit protocol
Sigma′s GenElute哺乳动物总RNA小量制备试剂盒提供了一种从哺乳动物细胞和组织中分离总RNA的简单便捷方法。提供了细胞，组织和纤维组织的方案。这些方案的细胞裂解和破坏条件不同。一旦RNA结合到GenElute结合柱上，所有起始物料的纯化程序都是相同的。对于纤维组织，试剂盒必须与蛋白酶K（目录号P4850）一起使用，以确保有效的细胞破碎。 该试剂盒结合了基于二氧化硅和微针形式的优点，无需使用氯化铯梯度、酒精沉淀和有害的有机化合物，如苯酚和氯仿。细胞或组织在含有硫氰酸胍的缓冲液中裂解和匀浆，以确保
大分子彻底变性和RNase失活。当裂解物在微量离心管中通过二氧化硅膜旋转时，乙醇的加入会导致RNA结合。 洗涤去除污染物后，在50-100 μL洗脱液中洗脱RNA。 在不到30分钟的时间内可以分离出多达150 μg的总RNA。

如果必须消除所有痕量的DNA污染，建议用DNase I进一步处理。当RNA与GenElute结合柱结合时，可使用柱上DNase I消化装置（DNASE10和DNASE70）进行DNase I消化。或者，为了更严格地去除污染的DNA，可以用扩增级DNase I（AMPD1）处理最终的RNA制剂。
我们致力于为您提供更环保的替代产品，以符合“绿色化学的12项原则”的一项或多项原则要求。相比使用苯酚和氯仿的标准DNA提取方法，该产品是一种更安全的化学产品。

Application

GenElute^™ 哺乳动物总RNA小量制备试剂盒可从以下组织分离总RNA：

• 大鼠脑的速冻视前区
• 油黑壳菜蛤包含性腺的外套膜组织的中央部分
• 鼠的肝脏

Biochem/physiol Actions

GenElute哺乳动物总RNA Miniprep试剂盒将硅胶膜技术与方便的旋转柱形式相结合，以快速结合，洗涤和洗脱的方法制备高质量的总RNA。
将样品裂解并在硫氰酸胍和2-巯基乙醇中匀浆以释放RNA并灭活RNase。裂解物通过过滤柱旋转以去除细胞碎片和剪切DNA。然后将滤液加到高容量硅胶柱上以结合总RNA，然后洗涤和洗脱。每个制备液在100 μl水中最多可回收150 μg总RNA。纯化的RNA准备用于印迹杂交（图1），RT-PCR（图2）和其他常见应用。

Features and Benefits

• 从每个制备物中纯化多达10⁷个细胞或40 mg组织中的总RNA
• 每次制备最多可产生150 μg纯的浓缩总RNA
• 从少至100个细胞中回收RNA
• 简单高效-30分钟内制备12-18次
• 比重力流阴离子交换方法快
• 没有与树脂和磁浆相关的繁琐步骤
• 每个试剂盒的纯化比**供应商多40%

• 每次制备最多可产生150 μg纯的浓缩总RNA
• 从每个制备物中纯化多达10⁷个细胞或40 mg组织中的总RNA
• 从少至100个细胞中回收RNA

Other Notes

GenElute^™哺乳动物总RNA纯化试剂盒将硅胶膜技术与方便的旋转柱形式相结合，以快速结合，洗涤和洗脱的方法制备高质量的总RNA。
有关其他信息，请参阅 www.sigma-aldrich.com/totalrna。

Legal Information

GenElute is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC