Protector RNase抑制剂，2000UNITS，3335399001，Roche

General description

组分
Protector RNase抑制剂（40 U/μl）储存液：20 mM HEPES-KOH，50 mM KCl，8 mM 二硫苏糖醇, 50% 甘油（v/v）pH 7.6左右（+4°C）。
Protector RNase抑制剂可广泛灭活各种RNase，包括

• RNase A
• RNase B
• RNase T2

• 在cDNA合成反应RT-PCR期间或体外转录/翻译反应过程中保护mRNA（在传统热循环和qPCR系统中）
• 在体外病毒复制期间保护病毒RNA
• 在RNA分离纯化期间抑制核糖核酸酶
• 用于RNase保护测定
• 帮助制备不含RNase的抗体

Application

Protector RNase抑制剂可用于：

• 在cDNA合成反应RT-PCR中保护mRNA（在传统热循环和qPCR系统中）例如，通过LightCycler^®设备、体外转录/翻译系统、RNase保护测定、体外RNA合成等
• 在体外病毒复制期间保护病毒RNA
• 在RNA分离纯化期间抑制核糖核酸酶
• 帮助制备不含RNase的抗体
• 合成用于原位杂交的RNA探针

Biochem/physiol Actions

Protector RNase抑制剂（20 U/ 20 μl反应容量）可抑制高达1 ng的RNase A、高达160 pg的RNase B和高达0.03 U/μl反应容量的RNase T2。


Protector RNase抑制剂不会抑制RNase H。


热灭活： > 65 °C

Features and Benefits

• 基于热稳定性的RNase抑制剂：即使使用热稳定性逆转录酶（如Transcriptor逆转录酶）的条件下，Protector RNase抑制剂仍保持稳定。
• 兼容广泛的反应条件：Protector RNase抑制剂在pH 5.0至9.0条件下和+25°C至+55°C的温度下都具有活性（+60°C时仍保留部分活性）。
• 避免各种RNA分析应用中的干扰：即使升高到标准浓度的16倍仍保持正常效能。
• 持续提供高纯度产物：每一批次的产品都进行严格质控流程，经实时定量RT-PCR等标准技术检测，确保不含核酸内切酶、核糖核酸酶或切割活性。

Preparation Note

工作浓度：

• 一步法RT-PCR中使用5至10 U
• 两步法RT-PCR中使用25至50 U
• 体外转录使用20 U

Analysis Note

每一批次的Protector RNase抑制剂均使用Titan One Tube RT-PCR试剂盒和LightCycler DPD试剂盒进行功能测试。Protector RNase抑制剂还经过污染活性测试，如下所述。
测试缓冲液：50 mM Tris-HCl，10 mM MgCl₂，0.1 mM EDTA，7 mM β-巯基乙醇；pH 7.5 (+37°C)。
不含核酸内切酶：在+37°C下，将1 μg的λDNA-EcoR I/Hind III*片段与Protector RNase抑制剂在50 μl测试缓冲液中一起孵育1小时。“核酸内切酶（Endo）”部分描述了不会导致带型发生变化的抑制剂用量。
不含开口活性：在+37°C下，将1 μg的超螺旋pBR322 DNA与Protector RNase抑制剂在50 μl测试缓冲液中一起孵育1小时。“开口活性（Nick.Act.）”部分描述了不会导致超螺旋DNA松弛的抑制剂用量。
不含核糖核酸酶(1)：在+37°C下，将5 μg的MS2 RNA与Protector RNase抑制剂在50 μl测试缓冲液中一起孵育1小时。“RNase 1”部分描述了不会导致MS2 RNA降解的抑制剂用量。
不含核糖核酸酶(2)：在+37°C下，将5 μg的MS2 RNA与Protector RNase抑制剂在50 μl测试缓冲液中一起孵育1小时，然后在 +65°C孵育10分钟。“RNase 2”部分描述了不会导致MS2 RNA降解的抑制剂用量。

Other Notes

1单位Protector RNase抑制剂定义为将5ng RNase A的活性抑制50%所需的酶量。

单位检测：按照Blackburn测试法，通过抑制环状胞苷-2'：3'-单磷酸的水解测定活性。在实验条件下，200U的Protector RNase抑制剂能够将1 μg RNase A的活性抑制50%。

体积活性：40 U/μl
产品详细说明：
来源：大鼠肺部；在大肠杆菌中进行重组
等电势点：pH 4.5
Protector RNase抑制剂的活性温度：25°C至+55°C；+60°C下仍具可测活力
失活条件：在强烈的变性条件（+65°C以上温度）下，本抑制剂将被失活
生物负载：<50 cfu/ml
DNA成份：<100 pg/mg
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

Legal Information

购买注意事项：许可免责声明
本品针对聚合酶链式反应（PCR）进行了优化，后者由F. Hoffmann-La Roche Ltd ("Roche"，)的**所保护。在这些**的保护下，购买本品的购买者不会以明示或暗示的方式获得PCR方法的使用许可。将PCR法用于某类研究或开发活动的许可，需通过购买Roche、Applied Biosystems及其他许可供应商的试剂，并配合在授权的PCR仪上使用来获得，也可通过联系Applied Biosystems来购买。（如用于）诊断目的则需要获得Roche的许可。如需购买许可方面的详细信息，请联系Applied Biosystems（850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA）的授权主管。
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