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General description
核糖核酸酶H(RNA酶H)是一种位于细胞核与细胞质中的非特异性核糖核酸内切酶,。它普遍存在并广泛分布于病毒和人类等多种生物中。
非(序列)专一性核糖核酸内切酶,可特异性地水解RNA:DNA杂合链中的RNA链。需要至少4个连续碱基对(RNA:DNA)才能发挥酶活性。RNase H可切割RNA释放出5′-寡聚核糖核苷酸。
来源:大肠杆菌H560 pol A1
存储液:25 mM Tris-HCl,50 mM KCl,1 mM 二硫苏糖醇,0.1 mM EDTA,50% 甘油 (v/v),pH 8.0 (+ 4°C)
单位体积活力:1 x 103 U/ml,按照Hillenbrand & Staudenbauer法分析。
Application
核糖核酸酶 H (RNase H) 已用于:
- 体内 RNA 引发的 DNA 合成初始化
- 第二链 cDNA 合成过程中 mRNA 消除
- RNA 的位点特异性切割
- 检测天然来源的双链DNA中的RNA:DNA区域
- 如果存在 oligo (dT),则去除 mRNA 的 poly (A) 序列
- RNA提取和定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)
Biochem/physiol Actions
核糖核酸酶H(RNA酶H)特异性剪切RNA:DNA杂交体中的RNA。需要至少4个连续碱基对(RNA:DNA)才能发挥酶活性。RNase H可切割RNA释放出5′-寡核糖核苷酸。RNase H与核酸免疫有关。用RNase H降解mRNA,可消去80%的mRNA和蛋白表达。RNase H识别起始密码子和3′和5′端未翻译区。该酶参与DNA复制。
Features and Benefits
- 消除潜在的PCR误差来源。
- 在后续PCR过程中增加引物的可结合性。
Preparation Note
-15–-25 °C下储存(未开封)
激活剂:此酶在巯基试剂存在的条件下拥有**活性
Analysis Note
无核酸内切酶、核糖核酸酶和切割活性。
Other Notes
RNase H活性已按照Hillenbrand与Staudenbauer方法进行分析。一单位RNase H的定义为,在+37 °C的标准分析下,通过[3H] poly(A) x poly(dT) 在20分钟时间内生成1 nmol酸性可溶核糖核苷酸所需的酶量。
体积活性:约1 U/μl
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。在cDNA合成步骤之后使用RNase H能够提升两步法RT-PCR分析的灵敏性。
| biological source | Escherichia coli ( |
| assay | 100% |
| form | solution |
| specific activity | ~40000 units/mg protein |
| packaging | pkg of 100 U |
| manufacturer/tradename | Roche |
| technique(s) | cDNA synthesis: suitable |
| color | colorless |
| optimum pH | 7.5-9.1 |
| solubility | water: miscible |
| suitability | suitable for molecular biology |
| NCBI accession no. | NP_414750.1 |
| application(s) | life science and biopharma |
| foreign activity | RNase, none detected (up to 10 U with MS- II- RNA),endonuclease ~10 units, none detected (using lambda-DNA),nicking activity 10 units, none detected |
| shipped in | dry ice |
| storage temp. | −20°C (−15°C to −25°C) |
| Gene Information | Escherichia coli ... rnhA(946955) |
| 长度(mm) | |
| 宽度(mm) | |
| 高度(mm) | |
| 重量(kg) |




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