Sma I，1000UNITS，10220566001，Roche

Analysis Note

SuRE/Cut 缓冲液体系
建议使用粗体印刷的缓冲液以获得**活性

• A：100%
• B：0-10%
• H：0-10%
• L：0-10%
• M：0-10%

相容末端
Sma I 生成的末端与任何平端兼容。

同裂酶
该酶是 Cfr9 I、PspA I、Xma I 和 XmaC I 的同分异构体。

甲基化敏感性
Sma I 在识别序列的三个 C 残基（°）的中间不受 5-甲基胞嘧啶的抑制。但是，其活性任何其他 C 残基（*）处受到 5-甲基胞嘧啶的抑制，或在识别序列（*C°C*C↓GGG）中任何位置受 4-甲基胞嘧啶的抑制。

孵育温度
+25°C

经PFGE测试
Sma I 已经过脉冲场凝胶电泳（在细菌染色体上）测试。对包埋在 PFGE 分析用琼脂糖中的基因组 DNA（大肠杆菌 C 600）进行切割时，我们建议每 μg DNA 使用 10 U 酶，孵育时间为 4 小时。

连接和重切割测定
将通过完全消化 1 μg λDNA 获得的 Sma I 片段与 10 μl 的 1U T4 DNA 连接酶连接，连接方法是在 66 mM Tris-HCl 溶液（含 5 mM MgCl₂、5 mM 二硫赤藓糖醇、1 mM ATP，+20°C，pH 7.5）中在 +25°C 下孵育 16 小时，得到 1μg λDNA 片段回收率高于 80%。
随后用 Sma I 重新酶切，得到高于 80% 的典型 λDNA × Sma I 片段。
缺乏非特异性内切核酸酶活性
将 1μg λDNA 与过量的 Sma I 一起在 50μl SuRE/Cut 缓冲液 A 中孵育 16 小时。分析证书提供了不改变酶特异性模式的酶单位数量。

缺乏核酸外切酶活性
将约 5μg [3H] 标记的小牛胸腺 DNA 与 3μl Sma I 一起溶于 100μl 50mM Tris-HCl 溶液（含 10mM MgCl₂、1mM 二硫赤藓糖醇，pH 约 7.5）中，并在 +37°C 下孵育 4 小时。根据分析证书所述，在这些条件下，检测不到放射性释放。
在 PCR 缓冲液中的活性：100%

在 PCR 混合液（Taq DNA 聚合酶缓冲液）中的相对活性为 100%。PCR 混合物含有 λDNA、引物、10 mM Tris-HCl (pH 8.3，20°C)、50 mM KCl、1.5 mM MgCl₂、200μM dNTPs,2.5 UTaq DNA 聚合酶。混合物将进行 25 次扩增循环。Pwo SuperYield DNA 聚合酶 PCR 混合物反应缓冲液中的活性为 100%。如果添加富含 GC 的溶液，则其活性保持在 100%。Pwo SuperYield DNA 聚合酶 PCR 混合物不在美国销售。